Simoa數字式單分子免疫陣列分析儀使用要求如下:
一、設備設置與啟動要求
1.孔板體積與密封
使用封板膜密封孔板,確保至少30μL的過量溢出體積,防止液體泄漏影響檢測結果。
長期閑置時,需定期運行“StartofDay”和“EndofDay”程序(建議每周1-2次),避免設備性能下降。若超過一個月未使用,需排空管路。
2.液體廢棄物管理
運行前確認兩個廢棄物容器為空且已正確連接,通過指示燈驗證連接狀態(移除容器觀察指示燈切換,重新連接時確認閃爍)。
3.耗材與試劑管理
檢查軟件中的槍頭和光盤計數是否與實際一致,避免耗材不足導致實驗中斷。
使用自動掃描儀掃描試劑瓶條形碼,減少人為錄入錯誤。
二、Simoa數字式單分子免疫陣列分析儀操作流程規范
1.樣品處理
樣品收集、儲存和稀釋需按標準方法進行,避免污染或降解影響檢測靈敏度。
支持多種基質,但需根據樣品類型調整預處理步驟。
2.實驗步驟
磁珠捕獲抗原:利用表面標記捕獲抗體的磁珠結合樣品中的目標抗原。
檢測抗體標記:使用生物素標記的檢測抗體標記被捕獲的抗原。
酶復合物結合:加入鏈霉親和素-半乳糖苷酶復合物,與檢測抗體上的生物素結合。
磁珠與底物混合:將反應后的磁珠與底物混合,加載至含微孔陣列的檢測芯片中。
熒光成像與定量:通過磁場使磁珠落入微孔,加入油相隔離微孔,利用高分辨率熒光顯微鏡計數熒光點,依據泊松分布理論計算蛋白質濃度。
3.多重檢測能力
同一芯片可同時檢測多達10種目標分子,減少樣本與試劑用量,降低成本。
三、Simoa數字式單分子免疫陣列分析儀運行中注意事項
1.避免軟件卡頓
實驗運行過程中避免頻繁操作軟件,防止CPU過載導致數據丟失或設備故障。
2.反應杯加載器堵塞處理
若發生堵塞,嘗試初始化操作或執行“StartofDay”程序,必要時聯系技術支持。
3.錯誤信息處理
優先查閱分析指南或錯誤信息指南進行自助故障排除,無法解決時聯系技術支持。
四、Simoa數字式單分子免疫陣列分析儀設備維護與保養
1.日常清潔
定期清潔設備表面和內部組件,防止灰塵或殘留物影響檢測精度。
2.校準與驗證
按制造商建議定期校準設備,確保檢測結果的準確性和重復性(批間變異系數CVs<10%)。
3.長期存放
若設備長期閑置,需排空管路并存放于干燥、無腐蝕性氣體的環境中,避免部件老化。
